Peter Benjamin Parker is de zoon van Richard en Mary Parker, die beiden werkten voor de CIA en later voor S.H.I.E.L.D.. Nadat zij omkwamen bij een missie werd Peter, toen nog een baby, in huis genomen door Richards oudere broer Ben Parker en zijn vrouw May Parker. Hij groeide bij hen op in de wijk Forest Hills in het stadsdeel (borough) Queens in New York.
In de loop der jaren groeide Peter uit tot een eenzame en verlegen, maar uitermate slimme tiener. Dit kwam doordat hij, in tegenstelling tot veel leeftijdsgenoten, meer interesse had in zijn opleiding en studie (vooral natuurkunde en scheikunde) dan andere zaken. Hierdoor ging Peter altijd door het leven als een 'nerd'; hij werd gepest en beging de grootste blunders.
Op een dag, tijdens een schoolexcursie naar een laboratorium, werd Peter gebeten door een radioactief bestraald spinnetje. Al gauw had hij door dat de spinnenbeet een uniek effect op hem had. Terwijl hij naar huis liep, liep hij door een onbekende achterbuurt in de stad waar hij werd lastig gevallen door een ongure bende. Toen hij de leden van deze mensen met gemak opzij duwde was Peter geschokt door zijn eigen kracht. Terwijl hij vluchtte voor de bende liep hij in de richting van een snel rijdende auto. Om deze te ontwijken sprong hij 9 meter omhoog en bleef met zijn vingertoppen aan de muur kleven. Terwijl hij langs de muur naar beneden klom werd hij toegeroepen door een man beneden in de straat. Toen ontdekte Peter dat hij ook een soort spinneninstinct had dat hem waarschuwde voor gevaar en een perfect gevoel voor evenwicht net als een echte spin.